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近期准备基金申请、RIP 实验或执考刷题请进

1 一份申请书是否中标,1/3 看研究基础和文章情况,1/3 看标书思路和撰写,1/3 看专家素养。 科学问题是否凝练到位?是否具有创新性的学术思想和科学的研究思路?技术路线和研究…

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一份申请书是否中标,1/3 看研究基础和文章情况,1/3 看标书思路和撰写,1/3 看专家素养。


科学问题是否凝练到位?是否具有创新性的学术思想和科学的研究思路?技术路线和研究方案是否具体可行?任何小环节的失误都可能导致项目申请失败。


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RIP 技术(RNA 结合蛋白免疫沉淀),是研究细胞内 RNA 与蛋白结合情况的技术,是了解转录后调控网络动态过程的有力工具,能帮助我们发现 miRNA 的调节靶点。


RIP 实验基本原理


1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的 RNA 结合蛋白。


2. 防止非特异性的 RNA 的结合。


3. 免疫沉淀把 RNA 结合蛋白及其结合的 RNA 一起分离出来。


4. 结合的 RNA 序列通过 microarray(RIP-Chip),定量 RT-PCR  或高通量测序(RIP-Seq)方法来鉴定。


RIP 实验需要注意什么?


1. 防止 RNA 与蛋白非特异性结合。


2. 避免 RNA 蛋白质 结合被破坏。


3. 避免外源 RNase 污染。


4. 抑制内源 RNase 的活性。


5. 选择适合做 RIP 的抗体。


6. 避免 RNA 结合蛋白的降解。


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2. 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论);


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题图来源:© 图虫创意

本篇文章来源于微信公众号: 生物学霸

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